高效液相色譜法測定甲硝唑含量
甲硝唑是一種常用的抗生素，用于治療由厭氧菌引起的感染。高效液相色譜法（HPLC）是一種用于分離和分析極性和非極性化合物的色譜技術，具有快速、靈敏、準確的特點。內標法是一種常用的定量分析方法，通過在樣品中加入內標物質，根據(jù)內標物與待測物質的峰面積比計算待測物質的含量。
實驗試劑
| 品名 | CAS |
| 土霉素Oxytetracycline | 79-57-2 |
| 甲硝唑Metronidazole | 443-48-1 |
| 甲醇Methanol | 67-56-1 |
實驗步驟
1、色譜條件的選擇
????1)波長的選擇：選擇甲硝唑的最大吸收波長作為測定波長。
????2)流動相的選擇：使用甲醇-草酸水溶液（0.002mol?L?1）作為流動相。
2、內標物溶液的配制
????準確稱取土霉素，制成100mg?L?1的內標物溶液。
3、對照品溶液的制備
????準確稱取甲硝唑，制成100mg?L?1的對照溶液。
4、樣品溶液的制備
????取甲硝唑片研細，準確稱取適量，制成供試品溶液。
5、甲硝唑和土霉素純物質保留時間測定
????記錄內標物和對照品的保留時間。
6、校正因子的測定
????混合內標物和對照品溶液，計算相對校正因子。
7、樣品的測定
????混合樣品溶液和內標物溶液，進樣分析。
實驗小貼士:
用內標法進行定量分析時，內標物的選擇應符合什么要求？
????內標物的選擇應符合以下要求：與樣品中的待測物質在色譜條件下的分離度良好；與待測物質在化學性質上相似；不與待測物質發(fā)生反應；內標物在樣品中的添加量與待測物質的量比適當。
