Hepes緩沖劑是蛋白質(zhì)純化分析中常用的一種生物緩沖劑,其外觀為白色晶體粉末狀,使用時需要配置成溶液,來維持和穩(wěn)定實驗液體的pH值,因此hepes具有很好的水溶性,在pH值為6.8-8.2的范圍內(nèi)具有良好的緩沖能力,能較長時間控制恒定的pH值,且對細胞沒有毒性,不參與且不干擾生物化學(xué)的反應(yīng)過程,對酶化學(xué)反應(yīng)等沒有抑制作用。
蛋白質(zhì)分離純化是用生物工程下游技術(shù)從混合物中分離純化出所需要的目的蛋白質(zhì)的方法。而蛋白質(zhì)是生命的基礎(chǔ)物質(zhì),可以說沒有蛋白質(zhì)就沒有生命,機體中的每一個細胞和重要組成部分都有蛋白質(zhì)的參與。分離提純某一蛋白質(zhì),首先要求把蛋白質(zhì)從原來的組織或細胞中以溶解的狀態(tài)釋放出來,并保持原有的天然狀態(tài),不喪失生物活性。
一般的蛋白質(zhì)純化技術(shù)會選擇合適的生物緩沖劑把蛋白質(zhì)提取出來,再用離心除去不溶物得到含有目的物的粗提取液,此時需要緩沖液來維持粗提取液的pH值。根據(jù)以上對蛋白質(zhì)提取純化的了解發(fā)現(xiàn),hepes是非常適合用于此種實驗項目。因為hepes對細胞沒有毒性作用,且基本不會干預(yù)相關(guān)的生物化學(xué)反應(yīng),對實驗的干擾性小。